A、分离色素的原理是色素在层析液中的溶解度不同，A错误；B、研磨叶片时加CaCO3的作用是防止色素被破坏，二氧化硅破坏细胞结构，使研磨充分，B错误；C、色素分离的结果可以用如图表示（1、2、3、4分别是叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素），C错误；D、层析液可用93号汽油代替，进而将色素分离，D正确．故选：D．
