培养皿接种后为什么要倒置培养

1、倒置培养可以防止污染：为了防止正置培养时培养皿盖上出现的蒸馏水流到培养皿上，导致菌落成片，不能计数或分离等。同时也减少染菌的可能。

2、方便观察计数：平板倒置进行微生物培养时，培养基表面生长的菌落相对不会太快扩散，观察时有利于辨别菌落特征。

3、利于菌落出现：倒置后，琼脂表面不会残留水份，否则有水的话，细菌在表面生长成菌膜，菌落难以出现。

扩展资料

细胞培养的环境要求

1、无菌环境：无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内，解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。

2、合适的温度：一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37～38℃，不适宜的环境温度会影响细胞的生长。

3、适宜的渗透压：高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。因此，渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。

参考资料来源：百度百科-细胞培养

参考资料来源：百度百科-接种

参考资料来源：百度百科-稀释倒平板法

1、防止污染

为了防止正置培养时培养皿盖上出现的蒸馏水流到培养皿上，导致菌落成片，不能计数或分离等。同时也减少染菌的可能。

2、有利于菌落出现

倒置后，琼脂表面不会残留水份，否则有水的话，细菌在表面生长成菌膜，菌落难以出现。

3、方便观察计数：平板倒置进行微生物培养时，培养基表面生长的菌落相对不会太快扩散，观察时有利于辨别菌落特征。

扩展资料：

培养皿清洁步骤

一般经过浸泡、刷洗、浸酸、和清洗四个步骤。

1、浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡，软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗，然后用5%盐酸浸泡过夜；用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂，干涸后不易刷洗掉，故用后应立即浸入清水中备刷洗。

2、刷洗:将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中，用软毛刷反复刷洗。不要留死角，并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干，备浸酸。

3、酸:浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中，又称酸液，通过酸液的强氧化作用清除器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时，一般过夜或更长。放取器皿要小心。

4、冲洗:刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗，浸酸后器皿是否冲洗的干净，直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿，每件器皿至少要反复“注水－倒空”15次以上，最后用重蒸水浸洗2－3次，晾干或烘干后包装备用。

参考资料来源：

百度百科-培养皿

1、防止污染

为了防止正置培养时培养皿盖上出现的蒸馏水流到培养皿上，导致菌落成片，不能计数或分离等。同时也减少染菌的可能。

2、有利于菌落出现

倒置后，琼脂表面不会残留水份，否则有水的话，细菌在表面生长成菌膜，菌落难以出现。 

3、方便取拿

正放容易拿，减少手部细菌对培养皿的污染。

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微生物接种方法：

1、左手持皿用拇指、食指和中指将皿盖揭开约20-30度左右,角度越小遭空气污染的可能性越小,并靠近酒精灯附近操作。

2、右手持接种环，先在酒精灯灭菌，然后取菌液，将沾菌接种环在培养基的边缘划原始线。

而后使接种环在指力作用下作轻快的滑移动作，从培养皿的一个边缘滑向另一个边缘，滑动时用力要均匀，切勿将接种环嵌入培养基内。

一、持皿法

⑴将若干无菌培养皿叠放在左侧，便于拿取。

⑵点燃煤气灯，将火焰调到适中（空气不要太大，以免气流过急）。

⑶倒平板时，先用左手握住锥形瓶的底部，倾斜锥形瓶，用右手旋松棉塞，然后用右手的小指和手掌边缘夹住棉塞并将它拔出（切勿将棉塞放在桌面上），随之将瓶口周缘在火焰上过一下（不可灼烧，以防爆裂，以杀死可能沾在瓶口外的杂菌)。

然后将锥形瓶从左手传至右手中（用右手的拇指、食指和中指拿住三角瓶的底部），在这操作过程中瓶口应保持在离火焰2~3cm处，瓶口始终向着火焰。

左手拿起一套培养皿，用中指、无名指和小指托住培养皿底部，用食指和大拇指夹住皿盖并开启一缝，恰好能让三角瓶伸入，随后倒出培养基。一般约倒入12ml的培养基即可铺满整个皿底。

盖上皿盖，置水平位置等凝。然后再将三角瓶移至左手，瓶口再次过火并塞紧棉塞。

平板培养基的冷凝方法有两种，一种是将平板一个个摊开在桌面上冷凝，另一方法是将几个平板叠在一起冷凝。前者冷凝速度较快，在室温较高时采用。

而后者冷凝速度较慢，可在室温较低时采用，其优点是形成冷凝水少，尤其适用于平板划线等的需要。

二、叠皿法

此法步骤与持皿法基本相同。

不同点是左手不必持培养皿，而是将培养皿叠放在煤气灯的左侧并靠近火焰，用右手拿住三角瓶的底部，左手的掌背对着瓶口。

用小指与无名指夹住瓶塞，将其拔出，随即使瓶口过火，同时用左手开启最上面的皿盖，倒入培养基，盖上皿盖即移至水平位置待凝。

再依次倒下面的平板。在操作过程中，瓶口应向着火焰保持倾斜状，以防空气中微生物的污染。

参考资料来源：百度百科-接种

参考资料来源：百度百科-稀释倒平板法

培养皿接种后倒置培养主要是出于减缓蒸发、方便取用、便于观察、避免污染、方便收集、避免龟裂的考虑。

1、减缓蒸发：倒置培养皿可以减缓培养皿内培养基水分的蒸发；

2、方便取用：培养皿盖子大而底小，如果正着放，取用时容易只拿到盖子，从而造成平皿内培养基的暴露，可能会因此导致培养基产生污染或者出现平皿掉落等情况；

3、便于观察：培养皿倒置，可控制培养皿内的菌落蔓延，有利于形成单菌落，便于实验观察；

4、避免污染：倒置可以防止在实验过程中，培养皿内的水汽在皿盖上冷凝成水珠滴落到培养基上，将杂菌引入培养基，造成污染，从而影响到培养基中微生物的生长。

5、方便收集：有时候培养的目标是收集细菌的代谢物，然而代谢物有些会易溶于水，而培养皿正放时候盖上会出现蒸馏水，造成菌落成片，倒置培养皿能方便收集代谢物，以及进行计数或者分离等。

6、避免龟裂：在强制通风培养箱里面，可以用倒置培养皿的方法以减少培养基表面的空气流动，降低培养基水分蒸发速度，使得培养基不容易龟裂。

扩展资料：

培养皿的清洗：

（1）浸泡：

新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡，软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗，然后用5%盐酸浸泡过夜；用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂，干涸后不易刷洗掉，故用后应立即浸入清水中备刷洗。

（2）刷洗：

将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中，用软毛刷反复刷洗。不要留死角，并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干，备浸酸。

（3）浸酸：

浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中，又称酸液，通过酸液的强氧化作用清除器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时，一般过夜或更长。放取器皿要小心。

（4）冲洗：

刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗，浸酸后器皿是否冲洗的干净，直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿，每件器皿至少要反复“注水－倒空”15次以上，最后用重蒸水浸洗2－3次，晾干或烘干后包装备用。

参考资料来源：百度百科 - 培养皿

参考资料来源：百度百科 - 稀释倒平板法

1、避免培养基与培养皿脱离：倒完平板后，由于培养基尚有余温且刚凝固不久，水分较大、湿度较高，皿盖上凝结一些水珠。如果平板正放则冷凝的水滴会流到培养基里，不但易造成污染，还会使培养基与培养皿出现分离。

2、利于菌种的生长和繁殖：当培养条件为必须通风时，倒置的平板可以减少培养基表面的空气流动，减慢培养基中水分蒸发的速度，保持琼脂等固体培养基中的水分，充分的维持琼脂等凝固剂的弹性，延长培养基出现干裂的时间。

3、方便观察计数：平板倒置进行微生物培养时，培养基表面生长的菌落相对不会太快扩散，观察时有利于辨别菌落特征。

扩展资料

使用培养皿接种需要注意的：

1、使用前经过清洁消毒，培养皿清洁与否对工作影响较大，可影响培养基的酸碱度，若有某些化学药品的存在，会抑制细菌生长。

2、新购的培养皿应先用热水冲洗，再置于质量分数为1%或2%的盐酸溶液中浸泡数小时，使游离碱性物质除去，再用蒸馏水冲洗2次。

参考资料

百度百科-接种

百度百科-培养皿