PBS是pH7.4的磷酸盐缓冲液,PH是固定的,与人体血液等渗,所以一般用于分子克隆及细胞培养实验。
Tris-HCl是用三羟甲基氨基甲烷和盐酸配置,然后可以调节PH,各PH段都有用到,我们做蛋白实验用的较多的是PH6.8和PH8.8的,一般实验室用这个也是在蛋白质、DNA、RNA实验中。百度百科有一段解释:Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。 作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris,最好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
两者之间有时候也有联用,举个例子:我要提取动物的组织蛋白,开始可能需要用冷PBS缓冲液清洗一下,然后研磨提取蛋白,提取蛋白的裂解液中可能就有Tris-HCl作为缓冲液,此时就不适合用PBS了。
PBS和Tris-HCl缓冲液都是生物化学实验中常用的缓冲液,它们之间有一些区别和特定的用途。
区别:
成分不同:PBS是磷酸盐缓冲液,由磷酸盐、钾盐和钠盐组成。而Tris-HCl缓冲液是由三羟甲基氨基甲烷(Tris)和盐酸配置而成的。
pH缓冲范围不同:PBS的pH值是固定的,一般为pH7.4,与人体血液等渗,所以一般用于分子克隆及细胞培养实验。Tris-HCl的pH缓冲范围较广,一般在pH6.8-8.8之间,适用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长以及线虫核纤层蛋白中间纤维的形成等实验。
用途不同:PBS缓冲液主要用于生物化学实验中,对实验中的一些生物化学反应影响很小,如用于清洗细胞和分子克隆等。而Tris-HCl缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途,如用于蛋白质电泳缓冲液、制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物等。
联系:
Tris-HCl和PBS缓冲液都可以用于生物化学实验中,以提供稳定的酸碱环境,保证实验结果的准确性和可靠性。
有时候两者也会联用,例如在提取动物的组织蛋白时,可能需要先用冷PBS缓冲液清洗一下,然后在研磨提取蛋白的过程中使用含有Tris-HCl的裂解液。
PBS和Tris-HCl缓冲液在成分、pH缓冲范围和用途上有所不同,需要根据实验的具体需求和条件来选择使用哪种缓冲液。