转入大肠杆菌质粒还可以提取转入农杆菌?为什么?

2025-03-28 19:35:35
推荐回答(3个)
回答1:

首先,你的质粒必须是穿梭质粒,否则不可能转的。

如果是穿梭质粒的话,提取出来直接转化感受态的农杆菌就好。

步骤:
农杆菌感受态细胞的制备
1.挑取少许农杆菌,接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中,28℃、200r/mim培养过夜。
2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养,直至OD800 为0.5左右。
3.将培养物置冰浴中30min,4℃、5000r/min、离心5min,弃去上清液。
4.用10ml冷的0.1mol/L NaCl悬浮菌液。
5.4℃、5000r/min,离心5min,弃去上清液。
6.用1ml冷的CaCl2 (20mmol/L)悬浮,分装成50μl/管,液氮中冷冻后至-80℃保存

不是穿梭载体。

回答2:

都是的啊

回答3:

都是细菌,为什么不能。质粒又不那么认菌的