艾滋病病毒感染者的检测

2024-12-04 17:25:46
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免疫层析法试验
自1985年第一个艾滋病检测试剂问世以来,艾滋病检测已经变得越来越简便、灵敏、快速、无需特殊设备,可用肉眼直接观察结果。艾滋病检测纸条是在ELISA法基础上发展起来的一种检测技术,由于其具有操作简便、快捷、可单份检测、便于保存、不需特殊设备等优点,也广泛应用于临床对HBsAg进行初筛,对急诊及无偿献血的现场的筛查有其实用价值,可避免无效采血所造成的浪费,节省了大量的人力、物力,所以更多适用于急诊及无偿献血现场筛查等情况的需求。
胶体金法(金标)人类免疫缺陷病毒(HⅣ 1/2)抗体检测试剂盒是应用胶体金免疫层析技术建立的灵敏、特异、操作简便的一步法HⅣ 1/2抗体定性检测试剂。用于定性检测人血清或血浆样本中的HⅣ 1型和HⅣ 2型的特异性抗体,以辅助诊断HⅣ感染,其阳性结果需用免疫印迹法确认。其特点是方便、快速、高敏感性,是筛查艾滋病患者最为方便快捷的方法。同时也因为这种非常高的敏感性导致试剂可能出现假阳性。
分类一种是血检(全血、血清)试纸,一种是唾液(牙龈垢渗出液)试纸。血检试纸一般有进口试剂:雅培(血清),SD(全血);国产试剂:艾康(血清),爱己(全血)等
唾液检测试纸唾液检测试纸目前全球认可度比较高的是美国克利普特公司的aware爱卫品牌。。
酶联免疫吸附试验
ELISA法的基本原理是免疫反应物通过化学或免疫学的方法形成酶结合物,酶结合物能与待检样品中相应的抗原或抗体结合成为免疫复合物,然后加入酶底物,经酶的催化或水解作用,无色底物产生颜色,用肉眼、分光光度计观察结果。初筛用的HⅣ ELISA试剂目前已经发展到第四代检测试剂。第一代试剂主要以病毒裂解物或部分纯化的病毒抗原包被反应板,以检测血清中的抗体。由于包被的抗原不很纯,假阳性率较高。第二代试剂使用基因工程方法得到的重组抗原和合成肽包被反应板,由于纯化抗原的使用,特异性有了很大提高。第三代试剂使用双抗原夹心法检测抗体,进一步提高了敏感性。第四代试剂则在第三代的基础上进一步增加了P24抗原的检测,把HⅣ抗原和抗P24的抗体同时包被反应板,可同时检测血清中的HⅣ抗体和P24抗原。 免疫印迹试验
免疫印迹试验主要用于确认试验,基本原理是HIV全病毒抗原经过电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合。加入抗人IgG酶结合物和底物后,即可使有反应的抗原?抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果。有报告说,免疫印迹试验的特异性不是很好,有大约2%的假阳性率,但免疫印迹试验依然是目前最常用的HIV确认试验。
艾滋病感染,可以通过快速检测-初筛检测-确证试验的过程来确定自己是否真的已被感染。单纯通过快速检测或初筛检测不能够达到确证效果。如果在排除一些激素类药物影响的前提下,二种或二种以上快速检测试剂可以大体判断自身健康状况。 经过美国国家CDC和联合国艾滋病规划署的多年评价,以及多项大样本量研究。通过二种以上艾滋病初筛试剂同时作用于满足窗口期的受测者,可以明确的表达受测者的自身健康情况。既二种试剂都显示阴性,可以判断为阴性未感染艾滋病毒状况;二种试剂都显示阳性,可以判断为疑似阳性可能感染艾滋病毒状况,需要通过确证试验给出确证结果;一阴一阳再通过确证试验方式给出确证结果。
我国采供血机构的血液筛查以及各医疗卫生机构的常规筛查检测要求采用抗体夹心ELISA法,在尚未建立AIDS筛查实验室的偏远地区,或对医疗卫生机构需急诊手术、急诊分娩及VCT者,或估计难以再次随访到的对象,可采用快速法进行血液样本筛查。血液和血液制品的筛查必须使用HIV-1及 HIV-2的混合型试剂。检测结果如为阴性,在排除窗口期后可报告为无HIV感染;若呈阳性反应则应采用原有试剂和另一种不同原理或不同厂家的试剂进行复测,如2种试剂复测均呈阴性,则报告抗体检测阴性,如均呈阳性反应,或一阴一阳,则需送确证实验室进行确认。