不是有三步骤吗?
第一步也是关键就是检测目的基因(及重组运载体)是否导入受体细胞
用DNA分子杂交技术,用DNA探针,如果DNA出现杂交带,说明已经导入
第二步检测是否转录
也是利用DNA分子杂交技术,用DNA探针,手法也一样,如果RNA出现杂交带就成功转录
第三步是检测性状
直接观察或者用别的方法
比如检测抗虫性状,就用相应的害虫去检测是否能存活
当然首先应该用抗生素类物质或蓝白斑筛选。
首先让细胞在没有四环素的平板(但肯定要含另一种载体也抗的抗生素)上长,长出斑后,影印到另一块含四环素的平板上,如果在含四环素的平板上能长出来这为没有插入,不能长出来的为插入,然后对应分离没有四环素的平板上长出的菌。
检验是否产生相应形状,通常是受体细胞是否生产出了目的基因对应的蛋白质
这个可以用DNA探针来测得。