二级种和三级种培养基如何制作？

银耳二级种和三级种是采用木屑固体培养基。为确保菌种生长发育良好，在培养基选料和配制上必须把握好以下5点：

（1）精选原料

选用适合银耳菌丝生长的树种。食用菌制种专业户实践表明，山乌桕、盐肤木、油桐、米槠、野漆、黄连木、杧果、栓皮栎、白蜡树等较为理想。加工成木屑不宜太粗，一般以麦麸、米糠状细度为好。此外甘蔗渣也可利用。

（2）合理配方

现有银耳原种和栽培种的培养基配方有以下3种：

配方之一：木屑67%，麦麸30%，蔗糖1.5%，石膏粉1.5%。

配方之二：木屑70%，麦麸25%，蔗糖3%，石膏粉1.5%，硫酸镁0.5%。

配方之三：甘蔗渣72%，米糠24%，黄豆粉3%，碳酸钙1%。

银耳菌种需要含氮量高的培养料，因此麦麸用量比其他菇类菌种多，但在气温高的季节配制时适当少些；蔗糖用量视木屑材质好坏及季节适当调节。

（3）拌料均匀

把晒干的适生树木屑，同麦麸或米糠、石膏粉先搅拌均匀；把蔗糖和硫酸镁置于水中溶化后，混合于料中，然后反复搅拌均匀，过筛，将结团打散。

（4）水分达标

每100千克干料加入清水130千克左右，含水量60%～63%。拌匀待水分渗透料心时进行检测，通常以手握紧培养料能成团不松散，指间有水溢出一滴，即为适合的含水量。如果有水珠成串下滴，为含水量过多；若无水痕渗出，则含水量不够。在气温高的季节里制种时，若有空调设备，培养基的含水量也应稍多一些，培养基的pH为5～6。

（5）装料适量

把调制好的培养料装入750克的玻璃菌种瓶中，压实，表面按平。银耳菌种装料量与众不同，二级种装料占2/3瓶量，三级种只装1/2瓶量。装料后将菌瓶内外壁和瓶口擦净，塞棉塞，及时灭菌。

（6）灭菌彻底

培养基常压灭菌灭菌仓升温到100℃，保持10～13小时，再利用灶内余火焖2小时。灭菌达标后，去盖让水蒸气散发，并利用锅内余温将瓶口棉塞烤干，冷却4～6小时。高压灭菌，0.152兆帕压力保持1.5～2小时。高压蒸汽灭菌的温度和蒸汽压力的关系见表6。

表6 蒸汽压力与温度的关系